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      1. 乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)

        ELISA Kit for Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8)

        HMFG; MFGM; SED1; BA46; EDIL1; OAcGD3S; SPAG10; hP47; Medin; Lactadherin; Sperm Associated Antigen 10; Sperm Surface Protein hP47; Milk fat globule-EGF factor 8

        • 乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 產品包裝(模擬)
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        • 乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 實驗結果圖
        • SEB286Mu.jpg 標準曲線圖
        • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

        特異性

        本試劑盒用于檢測乳脂球表皮生長因子8(MFGE8),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
        由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

        回收率

        分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

        樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
        serum(n=5) 94-101 98
        EDTA plasma(n=5) 86-104 93
        heparin plasma(n=5) 90-99 95

        精密度

        精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
        批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
        批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
        批內差: CV<10%
        批間差: CV<12%

        線性

        在定值血清及血漿樣本內加入適量的乳脂球表皮生長因子8(MFGE8),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)含量的測定值與理論值的比率。

        樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
        serum(n=5) 90-97% 90-98% 92-101% 87-101%
        EDTA plasma(n=5) 79-91% 80-91% 80-94% 88-97%
        heparin plasma(n=5) 79-92% 90-97% 80-94% 83-97%

        穩定性

        經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
        為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

        實驗流程

        1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
        2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
        3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
        4. 洗板3次;
        5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
        6. 洗板5次;
        7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
        8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。

        實驗原理

        將乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

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        參考文獻

        雜志 參考文獻
        Fertility and Sterility Tumor necrosis factor α up-regulates endometrial milk fat globule-epidermal growth factor 8 protein production via nuclear factor κB activation, resulting in cell migration of epithelial cells. [Pubmed: 24262600]
        U.S. Patent Application Biomarker for amyloid-b-related neurological disorders [US20130302838]
        IUBMB Life. Elevated serum milk fat globule-epidermal growth factor 8 levels in type 2 diabetic patients are suppressed by overweight or obese status. [pubmed:28067023]
        Journal of diabetes investigation Circulating milk fat globule-epidermal growth factor 8 levels are increased in pregnancy and gestational diabetes mellitus. [pubmed:28035763]
        The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology Modifications of Western-type diet regarding protein, fat and sucrose levels as modulators of steroid metabolism and activity in liver [pubmed:27471150]
        Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology Depressive-like effect of prenatal exposure to DDT involves global DNA hypomethylation and impairment of GPER1/ESR1 protein levels but not ESR2 and AHR/ARNT signaling [pubmed:28263910]
        Oncotarget Pantoprazole blocks the JAK2/STAT3 pathway to alleviate skeletal muscle wasting in cancer cachexia by inhibiting inflammatory response. [pubmed:28489606]
        Molecular and Cellular Neuroscience TGF-β1 enhances phagocytic removal of neuron debris and neuronal survival by olfactory ensheathing cells via integrin/MFG-E8 signaling pathway [10.1016/j.mcn.2017.08.006]
        Amyloid Needle-shaped amyloid deposition in rat mammary gland: evidence of a novel amyloid fibril protein [Pubmed: 31615282]
        clinical and translational medicine Milk fat globule EGF factor 8 restores mitochondrial function via integrin?\medicated activation of the FAK?\STAT3 signaling pathway in acute pancreatitis [33634976]
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