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      1. 血管鈣化(VC)大鼠模型

        Rat Model for Vascular Calcification (VC)

        • SPF
        • 編號DSI845Ra01
        • 物種Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名稱,不同的物種。
        • 原型物種Human
        • 來源維生素D3(Vitamin D3) 導致
        • 模式動物品系SPF級SD大鼠,健康,6~8W,雄性,體重180g-200g
        • 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組
        • 實驗周期8 weeks
        • 建模方法血管鈣化動物模型
          每日維生素D3(Vitamin D3) 30萬IU/kg體重肌肉注射,連續四周;
          每日尼古丁灌胃兩次:將尼古丁溶于花生油灌胃(25mg/kg),9h后再灌胃1次,連續四周。
          注意事項:
          維生素D3主要造成血管鈣化,尼古丁刺激心跳加速血壓升高每次灌胃完都要觀察動物狀態,老鼠灌胃后會抽搐,需要人工按壓給緩解。

          血漿制備:模型制備結束,各組大鼠用戊巴比妥鈉深度麻醉大鼠,腹主動脈取血,注入含7.5%EDTA 二鈉30ul、40ul 和抑肽酶40ul 的試管中,離心分離血漿。-20℃保存待測。
          組織制備:各組大鼠取血后處死,取大鼠胸主動脈段,置入4%多聚甲醛固定液中,脫水,石蠟包埋,切片,備用
          病理組織進行Von Kossa染色。
        • 應用疾病模型
        • 下載 英文說明書   中文說明書
        • 規格 每例
        • 價格 ¥ 1560
        • 欲了解實際交易價格和更多情況,請與當地經銷商聯系!
        • 血管鈣化(VC)大鼠模型 產品包裝(模擬)
        • 血管鈣化(VC)大鼠模型 產品包裝(模擬)
        • 血管鈣化(VC)大鼠模型 Fig.Von Kossa staining of Aortic vessels in model rat
        • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

        模型評價

        1.血管鈣含量測定: 取10mg腹主動脈溶于硝酸消化、烤干,用含有
        27nmol/LKCl和 27μmol/L LaCl3的去離子水復溶,用原子分光光度計在442.7nm
        處讀取吸光度,后換算成組織鈣含量(以μmol/gdw 表示)
        2.ALP活性測定:取腹主動脈勻漿,8000×g離心10 min,取上清液??捡R
        斯亮藍法蛋白定量。按試劑盒說明方法測定血管組織ALP活性,紫外分光光度計
        在405nm處讀取吸光度。具體步驟:加入緩沖液,370C孵育30min,NaOH終止反應,測定405nm下的吸收值。ALP活性用p2硝基苯酚為標準值計算,1單位表示30min內產生1nM硝基酚的活性。BCA法測定總蛋白定量,校正ALP活性。

        組織病理學

        病理組織Von Kossa染色:
        取大鼠胸主動脈段,用石蠟包埋胸主動脈后切片,4μm厚切片,常規脫蠟、脫水。1%硝酸銀溶液浸泡,日光下照射30min后,將玻片浸入5%硫代硫酸鈉溶液1min,后用堿性品紅返染。脫水、透明、封片,用光鏡觀察。

        主動脈鈣化面積百分比測算:取主動脈弓至胸主動脈段血管1cm,沿縱
        軸剪開后Von Kossa 染色,用Image-Pro Plus 6.0 病理圖像分析軟件計算各實驗
        組大鼠鈣化斑塊面積百分比。

        免疫組化法觀察RUNX2、BMP2、RANK/RANKL/OPG水平:DAB顯
        色,蘇木素復染,常規梯度乙醇脫水,中性樹膠封片觀察。陰性對照以PBS代替一抗進行染色。每只大鼠隨機取3張結腸切片,每張切片光學顯微鏡下隨機選取5個高倍視野,統計每個視野中陽性組織細胞的積分光密度值(IOD值)與檢測面積的比值,即平均光密度值(MOD),以代表染色強度。

        標志因子水平

        Western blot 檢測RUNX2、BMP2、RANK/RANKL/OPG 蛋白表達

        統計學分析

        應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯

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        編號 適用物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 應用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!)
        DSI845Ra01 血管鈣化(VC)大鼠模型 疾病模型
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